خط مشی دسترسیدرباره ما
ثبت نامثبت نام
راهنماراهنما
فارسی
ورودورود
صفحه اصلیصفحه اصلی
جستجوی مدارک
تمام متن
منابع دیجیتالی
رکورد قبلیرکورد بعدی
نوع مدرک : TF
زبان مدرک : فارسی
شماره رکورد : 55940
شماره مدرک : ۳۹۶۶پ
شماره راهنما : QX
سرشناسه : ‏روستائی، ملیحه ‏
عنوان و نام پديدآور : [پایان نامه]بررسی میزان شیوع و باروری کیست هیداتید در دام‌های کشتار¬شده در کشتارگاه صنعتی شهر همدان در سال‌های 94-1393 و تعیین ژنوتیپ ایزوله‌های به‌ دست‌آمده با روش PCR-RFLP/ پژوهش و نگارش: ملیحه روستائی ؛ پژوهش و نگارش: ملیحه روستائی ؛ استادان مشاور: محمد فلاح ، امیرحسین مقصود ،مسعود سعیدی جم
وضعيت : همدان: دانشگاه علوم پزشکی، دانشکده پزشكي، كارشناسي ارشد انگل شناسي.، ۱۳۹۵
صفحه شمار : ۱۲۵ص.: جدول، مصور، نمودار
چکيده : مقدمه: هیداتیدوز یکی از مهم‌ترین بیماری‌های مشترک انسان و دام است که علاوه بر زیان‌های اقتصادی قابل‌توجهی که به جامعه وارد می‌نماید، ازنظر پزشکی و بهداشتی نیز دارای اهمیت ویژه‌ای است. با توجه به تنوع درون‌گونه‌ای در اکینوکوکوس گرانولوزوس و عدم تمایز استرین ها از طریق بررسی خصوصیات شکل شناسی، مطالعه بر روی خصوصیات اپیدمیولوژی و بررسی خصوصیات ژنتیکی آن، کمک شایانی به شناسایی استرین های مختلف این انگل در هر منطقه می‌نماید. استرین های متفاوت اکینوکوکوس گرانولوزوس دارای ویژگی‌های زیستی متفاوتی در زمینه‌های مختلف مانند خصوصیات آنتی ژنیک، چرخه زندگی و الگوی انتقال، قدرت عفونت‌زایی و دیگر ویژگی‌های حیاتی می‌باشند که شناسایی این تفاوت‌ها می‌تواند در کارآمدی استراتژی‌های طراحی‌شده در راستای درمان، کنترل و پیشگیری از این عفونت نقش مؤثری داشته باشد. همچنین به دلیل اینکه تاکنون در استان همدان مطالعه مولکولی جهت شناسایی ژنوتیپ‌های این انگل انجام‌نشده است، این مطالعه بر روی دام‌های این منطقه طراحی و اجرا گردید. مواد و روش‌ها: این مطالعه بر روی 10626 رأس از دام‌های کشتار شده در کشتارگاه صنعتی همدان در سال 94-1393 انجام شد. در این مطالعه احشاء دام‌ها به‌صورت چشمی و با معاینه فیزیکی و در صورت نیاز ایجاد برش در بافت‌ها و اندام‌ها، ازنظر آلودگی به کیست هیداتید موردبررسی قرار گرفتند و خصوصیات دام‌ها و کیست‌های هیداتید به‌صورت جداگانه در چک‌لیست‌هایی ثبت گردید. بافت‌های آلوده به کیست‌های هیداتید جمع‌آوری و پس از انتقال به آزمایشگاه تحقیقاتی گروه انگل‌شناسی و قارچ‌شناسی، مایع کیست‌ها تحت شرایط آسپتیک آسپیره شده و وجود پروتواسکولکس و میزان زنده‌بودن آن‌ها بررسی گردید. به‌منظور بررسی میزان زنده‌بودن پروتواسکولکس‌ها از عدم رنگ‌پذیری با ائوزین 1/0% و مشاهده حرکت پروتواسکولکس ها (سلول‌های شعله‌ای و انقباضات بدن) در زیر میکروسکوپ استفاده شد. جهت آزمایش‌های مولکولی، پروتواسکولکس‌های جداشده پس از شستشو با سرم فیزیولوژی استریل، در دمای 20- درجه سانتی‌گراد نگهداری گردید. استخراج DNA با استفاده از کیت High pure PCR template preparation kit شرکت Roche و بر روی 74 نمونه پروتواسکولکس انجام گردید. تکثیر قطعه ژنی rDNA-ITS1 به طول حدود 1000bp به‌وسیله آزمایش PCR انجام شد، سپس جهت برش آنزیمی محصول PCR و تعیین ژنوتیپ‌های انگل از چهار آنزیم RsaΙ AluΙ,HpaΙΙ,TaqΙ استفاده شد. یافته‌ها: از مجموع 10626 رأس دام بررسی‌شده، 3% (316 رأس) آلوده به کیست هیداتید بودند که میزان آلودگی در گوسفند 3%، در گاو 3/ 5% و در بز 1% به دست آمد. آلودگی به کیست هیداتید 2/47% در کبد و 9/51% در ریه مشاهده گردید. در هر سه نوع دام بیشترین بافت آلوده ریه (9/51%) بود. همه دام‌های آلوده دارای سن یکسال و بالاتر بودند. بیشترین و کمترین میزان باروری کیست هیداتید به ترتیب در گوسفند (3/69%) و گاو (8/6%) دیده شد. همچنین بیشترین میزان باروری کیست هیداتید در کیست‌های ریوی (8/53%) مشاهده گردید. پس از استخراج DNA تعداد 74 نمونه پروتواسکولکس حاصل از کیست‌های هیداتید، ژن rDNA-ITS1 به روش PCR تکثیر یافت که در همه نمونه‌ها منجر به تولید قطعه bp1000 گردید که هم‌اندازه قطعه rDNA-ITS1 در گونه اکینوکوکوس گرانولوزوس سنسو استریکتو (ژنوتیپ مجموعه G1-G3) است. برش آنزیمی توسط چهار آنزیم اندونوکلئاز RsaΙ, AluΙ,HpaΙΙ,Taq1 انجام شد. الگوی الکتروفورز قطعات به‌دست‌آمده نشان داد که تمامی نمونه‌ها شبیه هم و منطبق با گونه اکینوکوکوس گرانولوزوس سنسو استریکتو هستند. به‌طوری‌که با آنزیم AluΙ یک الگوی دو باندی با اندازه‌هایی حدود 200 و 800 جفت باز، با آنزیم RsaΙ قطعات 345 و 655 جفت باز، با آنزیم HpaΙΙ قطعات 300 و 700 جفت باز و با آنزیم TaqΙ هیچ برشی در محصول PCR ایجاد نگردید. نتیجه‌گیری: نتایج این مطالعه میزان قابل‌توجه شیوع هیداتیدوز در دام‌ها را نشان می‌دهد که مبین وجود چرخه فعال انگل در منطقه است. همچنین مطالعه خصوصیات مولکولی انگل، وجود مطلق اکینوکوکوس گرانولوزوس سنسو استریکتو (ژنوتیپ مجموعه G1-G3) را در دام های مورد مطاله نشان داد. این یافته، تاکید کننده‌ی حضور استرین گوسفندی به‌عنوان ژنوتیپ غالب در دام‌های این منطقه، همانند اغلب نقاط کشور می باشد که در چرخه حیات انگل، سگ به عنوان میزبان اصلی و دام نقش میزبان واسط را ایفا می‌نماید. بنابراین کنترل این انگل در سگ و گوسفند می‌تواند هیداتیدوز را در منطقه کاهش داده و متعاقب آن خطر انتقال عفونت به انسان را نیز تحت تاثیر خود قرار دهد.
موضوع : ‏اكينوكوكوس
Echinococcus
كيست هيداتيد
Echinococcosis
ژنوتيپ
Genotype
شناسه افزوده : ‏ متینی ،محمد‏ ، استاد راهنما
فلاح،محمد‏ ، استاد مشاور
مقصود،امیرحسین ، استاد مشاور
سعیدی جم،مسعود ‏ ، استاد مشاور
 
 
 
(در صورت عدم وضوح تصویر اینجا را کلیک نمایید)